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全铜电磁阀分析肝素钠与其类似物杂质的高效
全铜电磁阀分析肝素钠与其类似物杂质的高效
由于肝素钠在分子量分布和电荷差异上的异质性,对其进行有效分析一直是一个挑战。而且,这些杂质通常具有与肝素钠相类似的特性,使得在使用分析方法时很难区分肝素钠与其杂质。为了有效将肝素钠从杂质中(包括生产过程产生的杂质如硫酸皮肤素和非法添加的杂质如多硫酸软骨素)分离出来,美国药典(USP)颁布了一种采用离子交换色谱鉴定肝素钠及其杂质的色谱方法(注:中国药典对肝素钠的检测方法和USP相同)。然而,目前市面上的离子交换色谱柱很少能够满足USP的分离度标准,因此,迫切需要有一种新型填料来对其进行改善。赛分科技近日开发了一种离子交换色谱柱——Glycomix™SAX,可对如肝素钠这样的带多电荷聚糖样品实现高效分离
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图1肝素钠、硫酸皮肤素和多硫酸软骨素在Glycomix™SAX上的分离色谱图
色谱条件
Column:Glycomix™SAX,4.6x250mmGuardcolumn:Glycomix,4.6x50mmMobilephase:A:0.04%NaH2PO4,pH3.0B:0.04%NaH2PO4 14%NaClO4,pH3.0Flowrate:0.22mL/minGradient:20%-90%Bin60minutesWavelength:202nmColumntemp:25℃Injectionvolume:10mLPressures:9.5barSample:20mg/mLHeparinsodium1mg/mLDermatansulfate(DS)1mg/mLOversulfatedchondroitinsulfate(OSCS)inH2O
在Glycomix™SAX柱上,肝素钠和硫酸皮肤素的分离度为3.8,肝素钠和多硫酸软骨素之间的分离度为5.8,远远超过USP所要求的1.0和1.5。
图2肝素钠、硫酸皮肤素和多硫酸软骨素的标准曲线
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