可见分光光度计的工作原理
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源, 光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光
值与样品的浓度成正比。
分光光度计采用微机控制并进行数据处理,用干涉滤光片作为分光元件,光电管进行光电转换,
具有钾、钠浓度直读,曲线拟合,灵敏度漂移,自动校正,自动调满度。火焰能量指示,操作失误显
示,打印结果等功能,线性稳定性、重现性好,尤其适合临床应用。
可见分光光度计的法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物
质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区
,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可
见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度
,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。(上海岛韩) 单色光辐射穿过被测物质
溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:
A=-log(I/I。)=-lgT=kLc
此公式中 :A 为吸收度;
I。为入射的单色光强度;
I 为透射的单色光强度;
T 为物质的透射比;
k 为吸收系数;
L 为被分析物质的光程
c 为物质的浓度